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尿微量白蛋白的檢測方法
更新時間:2023-11-21 點擊次數:118

 目(mu)前(qian),尿(niao)微量(liang)白蛋(dan)白的檢(jian)測方法主(zhu)要有(you):ELISA方法(fa)、放射免(mian)疫(yi)(yi)法(fa)、化(hua)學發光(guang)法(fa)、免(mian)疫(yi)(yi)透射比濁(zhuo)法(fa)以及免(mian)疫(yi)(yi)熒光(guang)法(fa)。

 

  ELISA方(fang)法(fa)靈(ling)敏(min)(min)(min)性(xing)高,但操作(zuo)步驟多,等(deng)(deng)待檢(jian)(jian)測結果時(shi)間比(bi)較長(chang),需(xu)(xu)(xu)要有門(men)的(de)實驗室、業人員完(wan)成,一般用于(yu)(yu)大批量標本的(de)檢(jian)(jian)測。不適(shi)于(yu)(yu)少(shao)(shao)量或單(dan)份檢(jian)(jian)測的(de)快速(su)檢(jian)(jian)測。放射(she)免(mian)疫法(fa)靈(ling)敏(min)(min)(min)度高、操作(zuo)簡便,測量和(he)數據處理易于(yu)(yu)實現自(zi)動化。但因(yin)其(qi)(qi)為相對定(ding)量及存在放射(she)線輻射(she)、污染問題(ti)等(deng)(deng)應用較少(shao)(shao)。化學發光法(fa)因(yin)其(qi)(qi)特(te)異(yi)性(xing)、敏(min)(min)(min)感性(xing)高、簡便快速(su)、無需(xu)(xu)(xu)外(wai)(wai)來(lai)光源,背景噪音低應用廣泛,但其(qi)(qi)選(xuan)擇性(xing)差、其(qi)(qi)發射(she)強度依賴(lai)于(yu)(yu)各種環(huan)境(jing)因(yin)素(su)(su),需(xu)(xu)(xu)嚴格控制(zhi)外(wai)(wai)界(jie)各種因(yin)素(su)(su)。免(mian)疫透射(she)比(bi)濁法(fa)試劑較穩(wen)定(ding),自(zi)動化操作(zuo)減少(shao)(shao)了人為誤差,但其(qi)(qi)檢(jian)(jian)測需(xu)(xu)(xu)核實的(de)抗(kang)原抗(kang)體比(bi)例,需(xu)(xu)(xu)預先定(ding)值,否則造成誤差。免(mian)疫熒(ying)光法(fa)特(te)異(yi)性(xing)強、敏(min)(min)(min)感性(xing)高、操作(zuo)簡便、檢(jian)(jian)測時(shi)間短,即可批量檢(jian)(jian)測也可單(dan)份檢(jian)(jian)測,是臨(lin)床上常用的(de)快速(su)定(ding)量檢(jian)(jian)測方(fang)法(fa)。

 

  (1)尿液標(biao)本(ben)的采集

 

  尿(niao)(niao)常(chang)規檢查所(suo)用的隨機尿(niao)(niao)標本雖常(chang)用但不推(tui)薦,24小(xiao)時尿標(biao)本(ben)不(bu)易留(liu)取,一般可采(cai)用(yong)12小時夜尿(計(ji)量后取0.51ml送(song)化驗室);也可(ke)采用shou次晨尿或(huo)第二次尿,但(dan)注意(yi)尿液應在膀胱(guang)內超過(guo)3小時。

 

  測試(shi)應離心后(hou)采用上清液。測試(shi)尿(niao)微量(liang)白蛋白的時間(jian):

 

  1型糖(tang)尿(niao)病:發病5年或(huo)12歲以后,每(mei)年測1-3次;

 

  2型糖尿病:診(zhen)斷明(ming)確時測試,以后1-3/年。

 

  僅(jin)MAU陽(yang)性者:每3個月隨訪檢測。

 

  (2)尿微量白蛋白的(de)測定

 

  先,應多次測定。因為尿中(zhong)含量的上落較大,單次測定可(ke)能會造成(cheng)偏差(cha)。

 

  如shou次測試為陽性則應在3-6個月內(nei)再測二次以上,如3次中有二次陽性則為早(zao)期腎病。

 

  (3)檢(jian)測原理

 

  依據免疫(yi)熒光(guang)(guang)雙抗體(ti)(ti)(ti)夾(jia)心法定量(liang)(liang)(liang)檢(jian)測(ce)人(ren)尿(niao)液(ye)(ye)標本(ben)(ben)(ben)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)尿(niao)微量(liang)(liang)(liang)白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)含(han)(han)量(liang)(liang)(liang)。將檢(jian)測(ce)緩沖(chong)液(ye)(ye)和人(ren)尿(niao)液(ye)(ye)樣(yang)本(ben)(ben)(ben)在檢(jian)測(ce)管中(zhong)(zhong)(zhong)進行混合(he),緩沖(chong)液(ye)(ye)中(zhong)(zhong)(zhong)熒光(guang)(guang)標記(ji)的(de)(de)(de)抗人(ren)白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)抗體(ti)(ti)(ti)和尿(niao)液(ye)(ye)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)抗原結(jie)合(he)形成抗原抗體(ti)(ti)(ti)復合(he)物(wu),當混合(he)樣(yang)本(ben)(ben)(ben)加到檢(jian)測(ce)板樣(yang)品孔內(nei)后(hou),復合(he)物(wu)通(tong)過(guo)層析作用(yong)擴散到硝酸(suan)纖維素膜(mo)的(de)(de)(de)檢(jian)測(ce)線上(shang)并(bing)被檢(jian)測(ce)線上(shang)的(de)(de)(de)人(ren)白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)抗體(ti)(ti)(ti)所捕(bu)獲。因(yin)此尿(niao)液(ye)(ye)樣(yang)本(ben)(ben)(ben)中(zhong)(zhong)(zhong)白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)含(han)(han)量(liang)(liang)(liang)越高,檢(jian)測(ce)線上(shang)復合(he)物(wu)積累量(liang)(liang)(liang)越多。熒光(guang)(guang)抗體(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)信(xin)號(hao)反映(ying)了被捕(bu)獲的(de)(de)(de)白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)數量(liang)(liang)(liang)。通(tong)過(guo)免疫(yi)熒光(guang)(guang)檢(jian)測(ce)儀可檢(jian)測(ce)出尿(niao)液(ye)(ye)樣(yang)本(ben)(ben)(ben)中(zhong)(zhong)(zhong)白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)的(de)(de)(de)濃度(du)。檢(jian)測(ce)儀默(mo)認的(de)(de)(de)尿(niao)微量(liang)(liang)(liang)白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)(bai)檢(jian)測(ce)結(jie)果用(yong)mg/L為單位。尿微量白蛋白的(de)檢測(ce)范圍是(shi)2~300 mg/L,讀數結果可jing確到0.01 mg/L

 

 


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